Бактерії групи кишкових паличок. Кишкова паличка та інші бактерії цієї групи як жителі планети «Людина

між групами санітарно-показових мікроорганізмівнемає чітко окреслених кордонів. Деякі мікроорганізми є показниками як фекального, і орального забруднення. Деякі – показниками процесів самоочищення. У зв'язку з цим, всі СПМ розцінюють як індикатори біологічного забруднення.

Група А санітарно-показових мікроорганізмів. Включає мешканців кишечника людини та тварин. Мікроорганізми оцінюють як індикатори фекального забруднення. До неї входять БГКП - ешерихії, ентерококи, протеї, сальмонели. Також у групу А включені сульфітвідновлюючі клостридії (Clostridium petfringens та ін), термофіли, бактеріофаги, бактероїди, синьогнійна паличка, кандиди, акінетобактери та аеромонади.

Група В санітарно-показових мікроорганізмів. Включає мешканців верхніх дихальних шляхів та носоглотки. Мікроорганізми оцінюють як індикатори орального забруднення. До неї входять зелені, а-і (3-стрептококи, стафілококи (плазмокоагулюючі, літітіназа-позитивні, гемолітичні та антибіотикостійкі; у деяких випадках також визначають вид золотистого стафілокока).

Група З санітарно-показових мікроорганізмів. Включає сапрофітичні мікроорганізми, що мешкають у зовнішньому середовищі. Мікроорганізми розцінюють як індикатори самоочищення. До неї входять бактерії-протеоліти, бактерії-амоніфікатори та бактерії-нітрифікатори, деякі спороутворюючі бактерії, гриби, актиноміцети, целюлозобактерії, бделловібріони та синьо-зелені водорості.

Основні групи санітарно-показових мікроорганізмів

До основних санітарно-показових мікроорганізміввідносять БГКП, ентерококи, протеї, сальмонели, Clostridium perfringens, термофільні бактерії та бактеріофаги ентеробактерій (коліфаги).

Бактерії групи кишкової палички

Кишкова паличказапочаткувала всю групу СПМ. До складу БГКП включені різні представники сімейства Enterobacteriaceae. Залежно від мети та об'єкта дослідження до санітарно-показових БГКП висувають різні вимоги. Їх умовно поділяють на три підгрупи і за різних обставин використовують факт їхньої наявності для бактеріологічної характеристики об'єкта чи субстрату.

Підгрупа I кишкової паличкивключає БГКП, які намагаються виявити, але яких не повинно бути при дослідженні об'єктів та субстратів, «чистих» за своєю природою або які стали чистими внаслідок їх обробки (наприклад, термічної). До групи об'єктів, які мають такі властивості, входять такі. Питна (артезіанська, водопровідна хлорована, колодязна) та дистильована вода (взята з дистилятора або трубопроводу). Термічно оброблені харчові продукти (котлети, ковбаси, риба тощо). Аналізують проби, відібрані із товщі продукту.

Молоко(взяте з пастеризатора до вступу до молокопроводів), супи, соуси, компоти, другі страви (відібрані з казанів). Змив, відібраний при проведенні контролю ефективності дезінфекційної обробки в визначений термін (не раніше 45 хв і не пізніше 1 години після обробки).

Бактерії цієї підгрупи кишкової паличкиферментують лактозу та глюкозу або тільки глюкозу до газу при 37 °С і не виявляють оксидазну активність. У цю підгрупу входять Escherichia га//, клебсі-елли, цитробактери, ентеробактері та інші представники сімейства Enterobacteriaceae. Їх наявність допускається в об'єктах, які не належать до розряду чистих.

Підгрупа II кишкової паличкивключає БГКП, що вказують на невизначене за часом фекальне забруднення. Мікроорганізми зброджують лактозу та глюкозу до кислоти та газу при 43-44,5 °С. У цю підгрупу входять бактерії (Е. coli, клебсієли, цитробактери, ентеробактери та ін), що зберегли здатність до газоутворення при підвищеному температурному режимі. Подібні вимоги висувають до БГКП за неможливості вберегти субстрат від забруднення. У цьому слід обмежитися визначенням лише показників епідеміологічного неблагополуччя. До таких об'єктів відносять: воду відкритих водойм, стічні води, ґрунт та всі харчові продукти, для яких високий ризик обсіменіння після термічної обробки. У подібних випадках досліджують тверді харчові продукти (поверхневий шар), рідкі харчові продукти, другі та треті страви на роздачі, змив з обладнання та посуду. Посіви культивують за 43-44,5 °С. Е. coli диференціюють від інших бактерій по здатності ферментувати лактозу та глюкозу або лише глюкозу.

Підгрупа ІІІ кишкової паличкимістить БГКП, що вказують на свіже фекальне забруднення. Відмінна особливість бактерій цієї групи – здатність розщеплювати лактозу до газу при 43-44,5”С.

Бактерії групи кишкової палички (БГКП – коліформні бактерії)

Виявлення БГКП у харчових продуктах свідчить про їхнє фекальне забруднення. БГКП можуть потрапляти в продукти з води, обладнання, рук робочого персоналу та інших джерел. БГКП поділяють на дві підгрупи:

• 1) загальні коліформні бактерії, що розщеплюють глюкозу, лактозу та маніт з утворенням кислоти та газу при 37°С протягом 24 год;
• 2) термотолерантні коліформні бактерії, що розщеплюють глюкозу та лактозу з утворенням кислоти та газу при 43-44,5°С.

До групи БДКП входять пологиEscherichia , Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella , Serratia (Табл. 12.2).

Рід Escherichia.Типовим видом цього роду є Escherichia coli.Він відіграє важливу роль у мікробіоценозі кишечника людини та тварин.

Е. coli- дрібні грамнегативні палички із закругленими кінцями розміром (2-3) х (0,5-0,7) мкм. Не утворюють суперечки, нерухомі. Є рухливі варіанти за рахунок перитрихіально розташованих джгутиків, капсул не мають. Факультативні анаероби. Отримують енергію як у процесі дихання, і при бродінні. При зброджуванні вуглеводів Е. coliнакопичують кислоти - молочну, оцтову, бурштинову (позитивна реакція з метиловим червоним) та гази - С0 2 і Н 2 (бродильна проба). Ешеріхії добре ростуть на простих живильних середовищах. Оптимальна температура зростання становить 37 ° С, оптимальне значення pH середовища - 7,0-7,4.

Таблиця 12.2

Ознаки пологів, що належать до БГКП

Рід Enterobacter.Представники роду виявляються у прісній воді, ґрунті, стічних водах, на рослинах, овочах; їх виділяють із кишечника людини та тварин. Види роду в останні роки виділяють при гострих шлунково-кишкових захворюваннях, диспепсії, інфекціях жовчних та сечових шляхів, гнійних ураженнях мозкових оболонок, сепсисі у людей та тварин. Типовий вигляд - Е. cloacae.

Клітини Enterobacter -прямі палички розміром (2-3) х (0,5-0,6) мкм, перитрихи, грамнегативні, не утворюють спор та капсул. Оптимальна температура зростання 30-37 °С. Біохімічні ознаки видів цього роду: утворення ацетоїну при зброджуванні вуглеводів (позитивна реакція Фогес-Проскауера), розщеплення цитрату натрію серед Сіммонса.

Рід Citrobacter (citrus- (лимон) та bacter).Представники цього роду присутні у фекаліях людини та тварин, ґрунті, стічних водах, харчових продуктах. За певних умов вони можуть викликати захворювання, що протікають на кшталт гастроентеритів, диспепсій. При розвитку гнійно-запальних процесів найбільш значущим є вид C.freundii,який є типовим видом цього роду. Клітини цитробакторів – прямі палички розміром (1-6) х (0,5-0,8) мкм, одиночні або в парах. Перитрихи. Суперечка та цист не утворюють, капсул не утворюють. З. freundiiпродукує сірководень. На кров'яному агарі навколо колоній утворюються чіткі зони гемолізу.

Рід Klebsiellaназвано на честь бактеріолога Е. Клебса. Бактерії цього виду виділяють із води, грунту, харчових продуктів. Вони є у біоценозах носоглотки, кишечника. Викликають захворювання клебсієльоз у дітей віком до 1 року. Захворювання протікає як діареї, менінгіту, бронхопневмонії, гнійносептичних запалень. Представники роду: К. pneumonia,

К. mobilisта сапрофітні види: К. planticola, К. terrigena.Це прямі палички розміром (0,6-6,0) х (0,3-1,0) мкм, поодинокі або в парах. Відрізняються від інших ентеробактерій характерними ознаками: мають класичну полісахаридну капсулу і позбавлені джгутиків. Типовий вигляд - Klebsiella pneumonia.

Рід Serratia.Назва роду пов'язана з ім'ям італійського фізика Серафіно Серраті. Вони зустрічаються в ґрунті, воді, на поверхні рослин, а також у травному тракті людини, комах та гризунів як комэнсали. У осіб з ослабленою імунною системою серрації можуть викликати гнійні запалення різної локалізації. Типовий вигляд - Serratia marcescens. Serratia marcescens -це прямі дрібні палички розміром (05-08) х (09-20 мкм). Перитрихи за певних умов здатні утворювати капсулу. Більшість колоній Serratiaпофарбовані у різні відтінки червоного кольору за рахунок утворення пігменту продігіозину.

При характеристиці БГКП враховуються такі диференційно-діагностичні ознаки:

• 1) інкубація посівів при єдиному температурному режимі – 37°С;
• 2) здатність ферментувати лактозу - характер зростання серед Ендо (так званий лактозний тест). Враховуються колонії темно-червоні з металевим блиском або без нього;
• 3) оксидазний тест: колонії на середовищі Ендо досліджуються на наявність оксидази. Для подальшої ідентифікації залишають оксидазонегативні колонії. Колонії з позитивним оксидазним тестом, що відносяться до грамнегативних бактерій пологів Pseudomonas, Aeromonas, Vibrio,не враховуються;
• 4) препарати з характерних колоній забарвлюють за Грамом - враховуються грамнегативні палички;
• 5) бродильна проба на середовищі Гісса з глюкозою для виявлення здатності бактерій ферментувати глюкозу з утворенням кислоти та газу.

Крім БГКП збудниками кишкових захворювань, спричинених вживанням контамінованих харчових продуктів, можуть бути також бактерії пологів Morganellaі Providenciaіз сімейства Enteribacteriaceae.

Коліформні бактерії Коліформні бактерії

грам-аспорогенні оксидазонегативні, що ростуть на середовищі Ендо і ферментують лактозу з утворенням к-ти і газу при 37 ° С протягом 48 годин ентеробактерії. б. нормуються за міжнародними стандартами як показник фекального забруднення К. б. разом з аналогічними по св-вам, але ферментуючими глюкозу з утворенням к-ти і газу протягом доби бактеріями складають групу кишкової палички, к-ра нормується як показник фекального забруднення.

(Джерело: «Словник термінів мікробіології»)

Дивитись що таке "Коліформні бактерії" в інших словниках:

коліформні бактерії- 3.2 коліформні бактерії (coliform bacteria): Лактозопозитивні бактерії, що є оксидазонегативними при випробуваннях за стандартним тестом. Джерело: ГОСТ Р 52426 2005: Вода пиття.

Коліформні бактерії термотолерантні- бактерії, що мають всі ознаки загальних коліформних бактерій і здатні ферментувати лактозу до кислоти і газу при температурі 44 С протягом 24 год. Вказують на фекальне, що нещодавно потрапило у воду. Офіційна термінологія

Коліформні бактерії загальні- Загальні коліформні грамнегативні бактерії, що не утворюють спор палички, продукують альдегід на диференціальних лактозних середовищах, не мають оксидазної активності, ферментують лактозу або маніт з утворенням кислоти і газу при… Офіційна термінологія

термотолерантні коліформні бактерії- Бактерії, що мають ознаки загальних коліформних бактерій, а також здатні ферментувати лактозу до кислоти, альдегіду та газу при температурі 44 °С протягом 24 годин.

термотолерантні коліформні бактерії- 64 термотолерантні коліформні бактерії; термотолерантні коліформи: Бактерії, що мають ознаки загальних коліформних бактерій, а також здатні ферментувати лактозу до кислоти, альдегіду та газу при температурі 44 °С протягом 24 год. Словник-довідник термінів нормативно-технічної документації

загальні коліформні бактерії- загальні коліформи: Грамнегативні оксидазонегативні не утворюють спор палички, здатні рости на диференціальних лактозних середовищах, що ферментують лактозу до кислоти, альдегіду та газу при температурі 37 °С протягом 24 48 год. Примітка … Довідник технічного перекладача

Кишкові палички (лат. Escherichia coli) мікроорганізм відкритий 1885 р. Ешеріхом із залишків життєдіяльності людини. Цей мікроорганізм є постійним мешканцем товстого відділу кишечника людини та тварин. Окрім Е. coli, у групу… … Вікіпедія

Див. також: Кишкова паличка Бактерії групи кишкової палички (БГКП, також називаються коліморфними та коліформними бактеріями), яка умовно виділяється за морфологічними та культуральними ознаками група бактерій сімейства ентеробактерій, що використовується… … Вікіпедія

ГОСТ 30813-2002: Вода та водопідготовка. терміни та визначення- Термінологія ГОСТ 30813 2002: Вода та водопідготовка. Терміни та визначення оригінал документа: 65 Esherichia coli; E. coli: Аеробні та факультативно анаеробні термостійкі коліформні бактерії, які ферментують лактозу або манітол при… Словник-довідник термінів нормативно-технічної документації

ГОСТ Р 52426-2005: Вода питна. Виявлення та кількісний облік Escherichia coli та коліформних бактерій. Частина 1. Метод мембранної фільтрації- Термінологія ГОСТ Р 52426 2005: Вода питна. Виявлення та кількісний облік Escherichia coli та коліформних бактерій. Частина 1. Метод мембранної фільтрації оригінал документа: 3.4 Escherichia coli (E.coli): Стійкі до жовчі бактерії, які … Словник-довідник термінів нормативно-технічної документації

Бактерії групи кишкової палички (БГКП) - це умовно виділяється за морфологічними і культуральними ознаками група бактерій сімейства ентеробактерій, використовувана санітарної мікробіологією як маркер фекальної контамінації, належать до групи про санітарно-показових мікроорганізмів.

До бактерій групи кишкових паличок відносять представників пологів Escherichia (у тому числі і Е. coli), Citrobacter (типовий представник C. coli citrovorum), Enterobacter (типовий представник E. aerogenes), які об'єднані в одне сімейство Enterobacteriaceae завдяки спільності морфологічних та культуральних властивостей . Вони характеризуються різними ферментативними властивостями та антигенною структурою.

4. Наявність яких бактерій свідчить про свіже фекальне забруднення води?

До таких бактерій відносять термотолерантні коліформні бактерії, фекальні кишкові палички, що ферментують лактозу до кислоти і газу при температурі 44°С протягом 24 годин і не ростуть на нітратному середовищі.

Про свіже фекальне забруднення свідчить також виявлення ентерококу.

Відомий спосіб визначення свіжого фекального забруднення, що полягає у виділенні з досліджуваної води ентерококів і при індексі цих мікроорганізмів понад 500 передбачається надходження свіжого фекального забруднення.

5. Які показники визначають при санітарно-мікробіологічному дослідженні води?

1. Визначення кількості сапрофітних мікроорганізмів.

2 . Визначення числа лактозопозитивних кишкових паличок.

3 . Визначення числа Escherichia coli.

4. Визначення числа ентерококів.

5 . Визначення числа стафілококів.

6 . Визначення числа боїв фагів кишкових паличок.

7 . Визначення бактерій пологів сальмонела та шигела.

8 . Визначення наявності кишкових вірусів.

9 . Визначення холерного вібріона.

6. Що таке "мікробне число" та як його визначають?

Мікробне число - це кількісний показник бактеріальної зараженості навколишнього середовища, один з лабораторних санітарно-гігієнічних показників, що вказує на "загальну кількість мікробів" в 1 мл води, 1 г твердого продукту або ґрунту, 1 м 3 повітря, що виросли на МПА при 37°С за 48 год.

Для визначення мікробного числа роблять посіви з дотриманням правил асептики чашки Петрі з МПА методом заливання з таким розрахунком, щоб на чашках виростало від 30 до 300 колоній.

7. Який метод використовують для виявлення БГКП у воді?

Для визначення кількості бактерій групи кишкової палички існує два методи: бродильний та мембранний фільтр.

Сутність методу мембранних фільтрів полягає у концентруванні бактерій з певного об'єму досліджуваної води на мембранному фільтрі та вирощуванні їх при температурі 37 ± 0,5 ° С в середовищі Ендо. За цієї температури створюються оптимальні умови для вирощування бактерій.

8. Для яких цілей використовують методи Коха та Кротова?

Методи Коха та Кротова використовують для санітарно-мікробіологічного дослідження повітря.

9. Назвіть санітарно-показові мікроорганізми, за наявності яких у повітрі можна оцінити його чистоту?

Санітарно-показовими мікроорганізмами для повітря є золотисті стафілококи та гемолітичні стрептококи (Staphylococcus aureus, група Streptococcus viridans та Streptococcus haemolyticus).

10. У чому полягає аспіраційний метод і з метою його використовують?

Аспіраційний метод заснований на примусовому осіданні мікроорганізмів на поверхню щільного живильного середовища або в рідину, що вловлює. Для цієї мети використовуються апарат Кротова, бактеріоуловлювач Речменського, прилад ПОВ-1 та ін.

Для визначення загальної кількості бактерій забирають дві проби по 100 літрів кожна. Посіви інкубують у термостаті 24 години, а потім залишають на 48 годин при кімнатній температурі. Підраховують кількість колоній на чашках, обчислюють середнє арифметичне і роблять перерахунок кількості мікроорганізмів в 1 м 3 повітря.

Дослідження повітря включає визначення загальної кількості сапрофітних бактерій, стафілококів, стрептококів, які є показниками біологічної контамінації повітря мікрофлорою носоглотки людини.

11. На яких середовищах культивують БДКП?

На середовищі Ендо, на простих живильних середовищах: м'ясопептонному бульйоні (МПБ), м'ясопептонному агарі (МПА).

12. Які об'єкти та предмети підлягають дослідженню у приміщеннях аптек при санітарно-мікробіологічному контролі?

Об'єкти бактеріологічних досліджень у приміщеннях аптек при санітарно-мікробіологічному контролі:

1 . Вода дистильована.

2 . Ін'єкційні розчини до стерилізації.

3 . Ін'єкційні розчини після стерилізації.

4 . Очні краплі після стерилізації.

5 . Очні краплі, виготовлені в асептичних умовах на стерильних основах.

6 . Сухі лікарські речовини, які використовуються виготовлення ін'єкційних розчинів.

7. Аптечний посуд, пробки, прокладки та інші допоміжні матеріали.

8. Інвентар, обладнання, руки та санітарний одяг персоналу.

9 . Повітряне середовище.

Санітарна мікробіологія

Рецензент:Зав. кафедрою епідеміології ПДМА,

© ГОУ ВПО «ПДМА ім. ак. Є.А. Вагнера Росздрава»

1. Предмет санітарної мікробіології с3
2. Принципи та методи проведення санітарно-мікробіологічних досліджень с3
3. Основні групи санітарно-показових мікроорганізмів (СПМ) с5
4. Санітарна мікробіологія води с11
5. Санітарна мікробіологія ґрунту с14
6. Санітарна мікробіологія повітря с15
7. Санітарно-мікробіологічні дослідження в медичних закладах с16
8. Тестові завдання с19

Санітарна мікробіологія- Наука, що вивчає мікрофлору навколишнього середовища та її вплив на здоров'я людини та екологічну ситуацію в різних біотопах. Головне завдання практичної санітарної мікробіології – раннє виявлення патогенної мікрофлори у зовнішньому середовищі. При цьому слід пам'ятати, що людина та теплокровні тварини є основним резервуаром збудників більшості інфекційних захворювань та переважна кількість збудників передається за допомогою аерогенного та фекально-орального механізмів.

Початком розвитку санітарної мікробіології можна вважати 1888, коли французький лікар Є. Масе запропонував вважати кишкову паличку показником фекального забруднення води.

Принципи проведення санітарно-мікробіологічних досліджень

1. Правильний забір проб. Його проводять із дотриманням всіх необхідних умов, регламентованих кожному за досліджуваного об'єкта. Дотримується стерильності. За неможливості негайного проведення аналізу матеріал зберігають у холодильнику не довше 6-8 годин.
2. Серійність аналізів, що проводяться. Більшість об'єктів, що досліджуються, містять найрізноманітніші мікроорганізми, розподілені вкрай нерівномірно. Проводять забір серії проб із різних ділянок об'єкта. У лабораторії зразки змішують, а потім точно відміряють необхідну кількість матеріалу (зазвичай середня по відношенню до матеріалу, що досліджується в цілому).
3. Повторність відбору проб. Як правило, в об'єктах, що досліджуються, склад мікрофлори змінюється досить швидко, крім того, патогенні мікроорганізми розподіляються в них нерівномірно. Відповідно, повторний відбір проб дозволяє отримати більш адекватну інформацію.
4. Застосування лише стандартних методів дослідження – дає можливість отримувати порівняні результати у різних лабораторіях.
5. Використання комплексу тестів: прямих (що виявляють патогени) та непрямих.
6. Оцінка об'єктів за сукупністю одержаних результатів – з урахуванням інших гігієнічних показників (органолептичних, хімічних, фізичних тощо)

Методи проведення санітарно-мікробіологічних досліджень

Практична санітарна мікробіологія використовує два основні методи оцінки санітарно-епідемічного стану середовища.

I. Методи прямого виявлення збудника. Є найбільш точними та надійними критеріями оцінки епідемічної небезпеки зовнішнього середовища. Основний недолік – низька чутливість.

Трудність виділення патогеннихмікроорганізмів на живильних середовищах зумовлюють такі фактори:

1. Порівняно низький вміст патогенних мікроорганізмів у зовнішньому середовищі, що становлять 1/30000 всього видового складу мікрофлори зовнішнього середовища. Крім того, вона розподілена нерівномірно.
2. Виділення одного збудника не завжди свідчить про наявність інших видів патогенів. Тобто необхідно проводити дослідження практично щодо кожного патогену, що не здійсненно.
3. Мінливість патогенів. Останні, потрапляючи у зовнішнє середовище, набувають нових властивостей, що ускладнюють їхнє розпізнавання.
4. Конкурентні взаємини між патогенами та сапрофітами при спільному вирощуванні на живильних середовищах.
5. Недостатня елективність поживних середовищ та необхідність використання лабораторних тварин та культур тканин.

ІІ. Методи непрямої індикації можливої ​​присутності збудника у зовнішньому середовищі.

Використовують два критерії, за якими можна побічно судити про можливу присутність збудника у зовнішньому середовищі:

1. Загальне мікробне число (ЗМЧ)
2. Зміст санітарно-показових мікроорганізмів (СПМ)

- Загальне мікробне число (ЗМЧ)визначають шляхом підрахунку всіх мікроорганізмів в 1 г або 1 мл субстрату.

При цьому виходять із припущення, що чим більший об'єкт забруднений органічними речовинами, тим вище ОМЧ і тим вірогідніша присутність патогенів. Однак, це не завжди так, оскільки ЗМЧ може бути більшим за рахунок сапрофітів, а патогени можуть бути відсутніми. Тому більш адекватно розцінювати ЗМЧ як показник інтенсивності забруднення довкілля органічними речовинами.

ЗМЧвизначають двома методами:

1. Прямий підрахунок.Проводять під мікроскопом за допомогою спеціальних камер, наприклад Петрова або Горяєва, або спеціальних електронних лічильників. Попередньо досліджувану пробу гомогенізують та вносять барвник (зазвичай еритрозин). Можна проводити прямий підрахунок і на мембранних фільтрах, через які пропускають досліджувану рідину або завись. Метод застосовують у екстрених випадках. При необхідності термінової відповіді про кількісний вміст бактерій (наприклад, при аваріях у системі водопостачання, в оцінці ефективності роботи очисних споруд та ін.). Основний недолік - неможливість підрахувати бактерії, коли утворюються їх скупчення або коли вони прилипають до частинок досліджуваного субстрату. Не вдається підрахувати дрібні мікроорганізми, а про віруси. І, нарешті, не можна відрізнити живі від загиблих мікроорганізмів.
2. Кількісний посів на живильні середовища.З приготовлених серійних десятикратних розведень досліджуваної рідини або суспензії по 1 мл переносять у стерильні чашки Петрі і заливають розплавленим і остудженим до 45-50 0 МПА. Поступово змішують рідини і після застигання агару чашки поміщають у термостат. Після інкубації підраховують кількість колоній, що виросли, і з урахуванням розведень вираховують кількість життєздатних мікробів в одиниці об'єму досліджуваного об'єкта. При цьому виявляються лише мезофільні аеробні та факультативно-анаеробні бактерії, здатні розмножуватися на МПА. Таким чином, одержувані цифри значно нижчі від справжньої кількості мікроорганізмів у досліджуваному об'єкті.

-Санітарно-показовими називають мікроорганізми,за якими можна опосередкованосудити про можливу присутність патогенів у зовнішньому середовищі. Виходять із припущення, що чим більше об'єкт забруднений екстрактами людини і тварин, тим більше буде санітарно-показових мікроорганізмів і тим вірогідніша є присутність патогенів.

Основні характеристики СПМ:

1. Мікроорганізм повинен постійно мешкати у природних порожнинах людини і тварин і постійно виділятися у зовнішнє середовище.
2. Мікроб не повинен розмножуватися у зовнішньому середовищі (за винятком харчових продуктів), або розмножуватися незначно.
3. Тривалість виживання мікроба у зовнішньому середовищі має бути не меншою, а навіть більшою, ніж у патогенних мікроорганізмів.
4. Стійкість СПМ у зовнішньому середовищі має бути аналогічною або перевищувати таку у патогенних мікроорганізмів.
5. У мікроба не повинно бути у зовнішньому середовищі «двійників» чи аналогів, з якими їх можна переплутати.
6. Мікроб не повинен змінюватися у зовнішньому середовищі, принаймні у терміни виживання патогенних мікроорганізмів.
7. Методи ідентифікації та диференціації мікроорганізмів мають бути простими.

СПМ умовно поділяють на 3 групи.

Між ними немає чітко окреслених меж; деякі мікроорганізми є як показниками фекального, і аэрогенного забруднення. Усі СПМ розцінюють як індикатори біологічного забруднення.

Група Авключає мешканців кишечника людини та тварин; мікроорганізми розцінюють як індикатори фекального забрудненняДо неї входять звані бактерії групи кишкових паличок – БГКП. (Для питної води за новим нормативним документом - Санітарно-мікробіологічний аналіз питної води. Методичні вказівки МУК 4.2.1018-01 – дана група називається загальні коліформні бактерії ОКБ); БГКП - ОКБ, ешерихії, ентерококи, протеї, сальмонели; а також сульфіт-відновлюючі клостридії (включаючи Cl.perfringens), термофіли, бактеріофаги, синьогнійна паличка, кандиди, ацинетобактери та аеромонади.

Група Ввключає мешканців верхніх дихальних шляхів та носоглотки; мікроорганізми оцінюють як індикатори аерогенного забруднення. До неї входять альфа- та бета-гемолітичні стрептококи, стафілококи (плазмакоагулюючі, лецитиназа-позитивні, гемолітичні та антибіотикостійкі; у деяких випадках визначають вид стафілококу – золотистий).

Група Свключає сапрофітні мікроорганізми, що мешкають у зовнішньому середовищі; мікроорганізми розцінюють як індикатори самоочищення. До неї входять бактерії-амоніфікатори, бактерії-нітрифікатори, деякі спороутворюючі бактерії, гриби, актиноміцети та ін.

Титр СПМ- Найменший обсяг досліджуваного матеріалу (в мл) або вагова кількість (в гр), в якому виявлена ​​хоча б одна особина СПМ.

Індекс СПМ– кількість особин СПМ, виявлених у певному обсязі (кількості) об'єкта, що досліджується. Для води, молока та інших рідких продуктів – 1 л; для ґрунту, харчових продуктів – в 1 р. Індекс – величина, зворотна титру, тому перерахунок титру в індекс і назад можна проводити за формулою: Т = 1000/І; І=1000/Т – для рідин. Відповідно для ґрунту та харчових продуктів Т=1/І, І=1/Т.

Як додатковий показник в даний час також використовують індекс найбільш ймовірного числа (НВЧ), що має довірчі межі, в межах яких може коливатися справжня кількість шуканого мікроба з 95% ймовірністю. Для визначення НВЧ дослідження проводять 3, 5, та 10 разів. Показник визначають за спеціальними таблицями Хоскенса-Мурі.

Основні групи СПМ

Бактерії групи кишкових паличок

Під загальною назвою «бактерії групи кишкових паличок» – БГКП – поєднуються бактерії сімейства Enterobacteriaceae,пологів Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella.За новими нормативними документами, виданими після 2001 року, ця група називається загальні коліформні бактерії - ОКБ. Характеристика даних груп однакова, до БГКП-ОКБ відносяться грамнегативні, не утворюють спор палички, що ферментують лактозу і глюкозу до кислоти і газу при температурі 37 0 С за 24 години і не мають оксидазної активності. Використання двох назв однієї й тієї групи бактерій пов'язані з застосуванням нормативних документів різного року випуску. Наприклад, у чинному Наказі № 720 від 31 липня 1978 р. «Про поліпшення медичної допомоги хворим з гнійними хірургічними захворюваннями та посилення заходів щодо боротьби з внутрішньолікарняною інфекцією» ця група називається БГКП і в результатах досліджень, проведених відповідно до цього Наказу, буде зазначено – БГКП виявлено (не виявлено). А при дослідженні питної води за методичними вказівками від 2001 року буде відзначено – ОКБ виявлено (не виявлено).

Escherichia coli

Мікроорганізм є родоначальником усіх СПМ. Це основний представник групи ОКБ, залежно від мети та об'єкта дослідження, у цій групі виділяють підгрупу ТКБ – термотолерантних коліформних бактерій.

Загальні коліформні бактерії.грам-, оксидаза-, що не утворюють суперечку палички, здатні рости на диференціальних лактозних середовищах, що ферментують лактозу до КГ при t 0 37 0 С протягом 24 годин.

Термотолерантні коліформні бактерії.входять до числа ОКБ, мають всі їхні ознаки, крім того, здатні ферментувати лактозу до КГ при t 0 44 0 С протягом 24 годин.

Як додатковий тест використовується визначення ферментації глюкози за різної температури культивування, оскільки відомо, що ОКБ, що виділяються з хлорованої води (водопровідної, плавальних басейнів та ін), не здатні викликати зброджування глюкози з утворенням газу при температурі 44 0 С.

Істотними недоліками E.coliяк СПМ є:

1. Велика кількість аналогів у зовнішньому середовищі;

2. Недостатня стійкість до несприятливих впливів зовнішнього середовища, наприклад, до різних хімічних речовин та змін рН. У той же час деякі патогенні мікроорганізми, особливо ентеровіруси, до них стійкіші;

3. Висока варіабельність, внаслідок чого питання її екології та діагностики не є остаточно вирішеними;

4. Відносно короткий час виживання у харчових продуктах, у той час як деякі патогенні мікроорганізми (наприклад, S.sonnei, S.schottmuelleri, ентеровіруси) зберігаються тривалий час;

5. Кишкова паличка розмножується у воді при вмісті органічних речовин не менше 280 мкг/л;

6. Кишкова паличка є нечітким індикатором. Наприклад, відомі спалахи сальмонельозу водного походження при вмісті збудників до 17 бактерій на 1 л, тоді як вміст E.coliне перевищувало 4 бактерій на 1 л, тобто залишалося майже нормальним.

Бактерії роду Enterococcus

Як СПМ запропоновані Хаустоном (1910). Рід включає 16 видів, основні поразки у людини викликають E.faecalis, E.faecium, E.durans.Ці бактерії відповідають цілій низці вимог, що висуваються до СПМ.

1. Ентерококи є постійними мешканцями кишечника людини, незважаючи на те, що в кількісному відношенні їх менше, ніж кишкових паличок.

2. Бактерії практично не здатні розмножуватися у зовнішньому середовищі (температура має бути 20 0 С та вміст органічних речовин має бути 375 мкг/л).

3. Ентерококи не виявляють вираженої мінливості у зовнішньому середовищі, що полегшує їхнє розпізнавання.

4. Ентерококи не мають аналогів у зовнішньому середовищі.

5. Ентерококи відмирають у зовнішньому середовищі значно раніше, ніж E.coli,тому вони завжди свідчать про свіже фекальне забруднення.

6. Найголовнішою перевагою ентерококів є їхня стійкість до несприятливих зовнішніх впливів. Ентерококи диференціюють за тестами стійкості Шермана.

а) Ентерококи стійкі до нагрівання до 65 °C протягом 30 хвилин, що робить їх показником якості термічної обробки або пастеризації.

б) Ентерококи стійкі до високих концентрацій NaCl (6,5-17%) – СПМ щодо морської води.

в) Ентерококи стійкі до коливань рН (3-12), що дозволяє використовувати їх як індикатор фекального забруднення в кислих та лужних продуктах (стічні води). У подібних умовах E.coliшвидко втрачає свої властивості і стає важкорозпізнаваною.

За кількістю та співвідношенням ентерококів та кишкових паличок судять про масивність та терміни фекального забруднення.

Бактерії роду Proteus

Є третьою (за значимістю) групою СПМ. Як СПМ запропоновані ще 1911 р. Рід включає 4 види; найбільше значення мають P.vulgaris, Р.mirabilis.При цьому P.vulgarisзазвичай розглядають як показник забруднення об'єкта органічними речовинами (бо його частіше виявляють у гниючих залишках), а Р. Mirabilis –як показник фекального забруднення (найчастіше виявляють у фекаліях). P.rettgeriчастіше виявляють у випорожненнях при кишкових інфекціях – тому його виявлення свідчить про епідеміологічне неблагополуччя. Представники роду Proteusдають характерне «повзуче» зростання на середовищах Ендо і Левіна, що часто затягує всю чашку. Можна проводити виділення протею за методом Шукевича – посівом у конденсат свіжоскошеного МПА (біля дна пробірки) – якщо в пробі є протей, затягне весь кіс агару.

Присутність протеїв у воді, харчових продуктах, змивах завжди свідчить про забруднення об'єкта субстратами, що розкладаються, і про вкрай неблагополучний санітарний стан. Харчові продукти, забруднені протеєм, зазвичай вибраковують; воду, що містить протей, не можна пити. Визначення протеїв рекомендовано для дослідження води відкритих водойм, лікувальних грязей. А для дослідження харчових продуктів виявлення протеїв передбачено ГОСТ.

Clostridium perfringens

Як СПМ запропонований ще 1895 р., майже одночасно з E.coli. Вілсон і Блейр (1924-1925 рр.) запропонували залізо-сульфітне середовище, яке дозволяє диференціювати клостридії фекального походження від клостридій, що мешкають у зовнішньому середовищі. Кишкові клостридії відновлюють сульфіти та викликають почорніння середовища, а вільноживучі клостридії не мають сульфіт-редуктази і не змінюють колір середовища. Почорніння середовища можуть викликати й деякі інші мікроорганізми, тому для пригнічення росту супутньої мікрофлори рекомендують культивувати посіви при 43-44,5 0 С або прогрівати проби при 80 0 С 15-20 хвилин. Т.о., Clostridium perfringensлегко виділяти та диференціювати. Однак, у Clostridium perfringensяк у СПМ є певні вади.

1. Паличка не завжди присутня у кишечнику людини.
2. Clostridium perfringensдовго зберігається у зовнішньому середовищі з допомогою спорообразования. Тому виявлення цього мікроорганізму свідчить про фекальне забруднення, що колись мало місце. Це індикатор можливої ​​присутності ентеровірусів.
3. Clostridium perfringensможе розмножуватися у зовнішньому середовищі (у деяких видах ґрунтів). Для проростання суперечка необхідна «температурний шок», тобто. прогрівання при 70°С 15-30 хвилин.

В даний час про давність фекального забруднення об'єкта запропоновано судити щодо порівняння кількості спорових та вегетативних форм Clostridium perfringens.З цією метою визначають кількість клостридій у прогрітих та непрогрітих пробах.

А) У прогрітих пробах індекс буде представлений лише споровими формами, що свідчать про давнє забруднення (у свіжих фекаліях 80-100% становлять вегетативні клітини).

Б) У непрогрітих пробах виявляють вегетативні та спорові форми.

Кількісний облік клостридій передбачено для дослідження грунту, лікувальних грязей, води відкритих водойм.

Clostridium perfringensне повинні виявлятися у 100 мл води на підприємствах харчової промисловості. Визначення мікроба проводять і в деяких харчових продуктах, але як можливого збудника харчових отруєнь. Критичний рівень Clostridium perfringensу готових стравах дорівнює 10 клітин на 1 мл або 1 г продукту. Готові консерви не повинні містити Clostridium perfringens.

За співвідношенням кількостей кишкової палички, ентерококів та клостридій судять про давність фекального забруднення.

Бактерії роду Salmonella

Є найбільш поширеними збудниками ОКЗ, і тому можуть бути індикаторами можливої ​​присутності інших збудників інфекцій з аналогічним патогенезом та епідеміологією.

В останні десятиліття сальмонели широко поширені у зовнішньому середовищі. Збільшилася кількість осіб – бактеріоносіїв (до 9,2%), які виділяють довкілля мільйони і мільярди клітин із кожним грамом фекалій, носійство у тварин ще більше виражено. У стічних водах м'ясопереробних підприємств сальмонели виявляють у 80-100% проб, у очищених стічних водах – у 33-95% зразків; бактерії виявляють також у хлорованих стічних водах.

Особливості сальмонел як СПМ

1. Ці мікроорганізми потрапляють у зовнішнє середовище лише з фекаліями людини та тварин. Їхнє виявлення завжди свідчить про фекальне забруднення.
2. Сальмонели не розмножуються у ґрунті; у воді вони розмножуються лише при високій температурі та високому вмісті органічних речовин.
3. При визначенні сальмонел слід визначати як відсоток позитивних знахідок, а й НВЧ. Тільки НВЧ дозволяє прогнозувати підйоми сальмонельозів та інших ОКЗ зі схожою етіологією.

Віруси бактерій

Як СПМ пропонують використовувати бактеріофаги кишкових бактерій (ешерихій, шигел, сальмонел). Кишкові фаги постійно виявляють там, де є бактерії, до яких адаптовані. Однак, як показники можливої ​​присутності патогенних бактерій, вони мають деякі недоліки. Наприклад, бактеріофаги виживають у зовнішньому середовищі довше (8-9 місяців), ніж відповідні бактерії (4-5 місяців). Але як показники фекального забруднення бактеріофаги мають суттєву цінність.

1. Бактеріофаги виділяють із стічних вод з тією ж частотою, що і багато патогенних вірусів (поліомієліту, Коксакі, гепатиту А).

2. Подібність до ентеропатогенних вірусів доповнює стійкість до дезінфектантів.

3. Методи виявлення фагів досить прості. Посіви виробляють у бульйон з індикаторною бактеріальною культурою. Після інкубування роблять пересіви на щільний агар, порівнюють ДЕЯ у досвіді та контролі і роблять висновки.

Бактерії роду Staphylococcus

Стафілококи є представниками нормальної мікрофлори. Основним місцем їх локалізації є слизові оболонки верхніх дихальних шляхів людини і деяких теплокровних тварин, а також шкірні покриви. Є стафілококи і в кишечнику здорових людей. В довкілля стафілококи потрапляють при розмові, кашлі, чханні, а також зі шкіри. Забруднення води водойм та басейнів відбувається при купанні людей, при цьому в басейнах число стафілококів може досягати десятків тисяч в 1 л води. З поширенням стафілококів у навколишньому середовищі тісно пов'язана проблема внутрішньолікарняних інфекцій стафілококової природи, яка пов'язана з носієм патогенних стафілококів у людей, особливо серед медичного персоналу. Все це дозволяє віднести стафілококи до бактерій-індикаторів повітряно-краплинного забруднення.

Стафілококи відносяться до сімейства Micrococcaceae,роду Staphylococcus.Вид S.aureusвідноситься до патогенних.

Як санітарно-показові мікроорганізми стафілококи мають деякі особливості:

1. Вони невибагливі до живильних середовищ, методи індикації їх у навколишньому середовищі простіше, ніж, наприклад, у стрептококів.
2. Стафілококи мають значну стійкість до різних фізичних і хімічних факторів впливу. Виходячи з резистентності стафілококів до дезінфікуючих речовин (особливо препаратів хлору), запропоновано застосовувати їх як СПМ забруднення води в зонах рекреації водойм (у тому числі морських), плавальних басейнів.
3. Є об'єктивним показником забруднення повітря закритих приміщень, оскільки показана кореляція між санітарно-гігієнічним сосоянням приміщень, кількістю людей, що знаходяться в них, числом носіїв патогенних стафілококів і вмістом стафілококів у повітрі.

Бактерії роду Streptococcus

Стрептококи, як і стафілококи, є мешканцями верхніх дихальних шляхів людини багатьох тварин. Вони постійно і у великих кількостях присутні в порожнині рота та носоглотці хворих з хронічними стрептококовими інфекціями верхніх дихальних шляхів, а також здорових людей і тому можуть потрапляти у повітря приміщень із бактеріальним аерозолем при розмові та кашлі.

Основна труднощі використання стрептококів як санітарно-показових мікроорганізмів полягає в тому, що стрептококи представляють велику групу, що поєднує велику кількість видів: від сапрофітів до патогенних стрептококів, що викликають такі захворювання, як скарлатина, бешихове запалення, сепсис і багато гнійно-.

Стрептококи відносяться до сімейства Streptococcaceaе,роду Streptococcus.Вид S.pyogenesмає найбільше значення у патології людини .

У навколишньому середовищі стрептококи представлені в основному -гемолітичні стрептококи (не повністю руйнують еритроцити, утворюють зелені зони навколо колоній). Це зумовлено тим, що майже у 100% здорових людей на поверхні мигдалин знаходяться α-гемолітичні стрептококи, у той час як β-гемолітичні стрептококи (викликають лізис еритроцитів і утворюють зону гемолізу) – тільки у 25-75%. Прийнято доцільним вважати сани показовими мікробами повітря сумарно α- та β-гемолітичні стрептококи.

Особливості стрептококів як СПМ:

1. Стрептококи не дуже стійкі у навколишньому середовищі, вони можуть зберігатися лише протягом кількох днів у пилу приміщень, на білизні, предметах побуту хворого. Однак терміни збереження їхньої життєздатності близькі до тривалості життя ряду патогенних бактерій, що потрапляють у навколишнє середовище повітряно-краплинним шляхом (наприклад, таких як збудник дифтерії та ін.)
2. Показником свіжішого забруднення повітря приміщень є α-гемолітичний стрептокок як найменш стійкий. У повітрі незаселених людиною приміщень стрептококи не виявляються.
3. Методи індикації та ідентифікації стрептококів складніші і трудомісткі порівняно з такими стафілококів.

Термофіли

Особливе місце серед СПМ займають термофільні мікроби, присутність яких у грунті або воді водойм свідчить про забруднення їх гноєм, компостом або фекаліями людей, що розклалися.

До термофільних мікроорганізмів належать грампозитивні бактерії, коки, бацили, спірили, актиноміцети, деякі види грибів, які здатні активно розмножуватися при температурі 60 0 С і вище. Більшість термофілів – аероби.

Термофільні мікроорганізми розмножуються в компостних купах і гною, в яких завдяки їхній життєдіяльності відбувається нагрівання до 60-70 0 С поверхневих шарів. У таких умовах відбувається процес біотермічного знешкодження органічних мас, що піддаються самонагріванню, гинуть патогенні мікроорганізми та кишкові палички.

Таким чином, присутність термофілів свідчить про давнє забруднення ґрунту компостами, при цьому БГКП (ОКБ) виявляються у незначних кількостях. І, навпаки, високий титр БГКП (ОКБ) за малої кількості термофілів – показник нового фекального забруднення.

Термофіли є також санітарно-показовими мікроорганізмами для характеристики окремих етапів процесу мінералізації органічних відходів.