Кишкова паличка коліформи. Бактерії групи кишкової палички (бгкп) та сальмонели: характеристика, санітарно-показове значення, методи визначення, нормування у харчових продуктах

Бактерії групи кишкової палички(БГКП – коліформні бактерії)

Виявлення БГКП у харчових продуктах свідчить про їхнє фекальне забруднення. БГКП можуть потрапляти в продукти з води, обладнання, рук робочого персоналу та інших джерел. БГКП поділяють на дві підгрупи:

• 1) загальні коліформні бактерії, що розщеплюють глюкозу, лактозу та маніт з утворенням кислоти та газу при 37°С протягом 24 год;
• 2) термотолерантні коліформні бактерії, що розщеплюють глюкозу та лактозу з утворенням кислоти та газу при 43-44,5°С.

У групу БДКПвходять пологиEscherichia , Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella , Serratia (Табл. 12.2).

Рід Escherichia.Типовим видом цього роду є Escherichia coli.Він грає важливу рольу мікробіоценозі кишечника людини та тварин.

Е. coli- дрібні грамнегативні палички із закругленими кінцями розміром (2-3) х (0,5-0,7) мкм. Не утворюють суперечки, нерухомі. Є рухливі варіанти за рахунок перитрихіально розташованих джгутиків, капсул не мають. Факультативні анаероби. Отримують енергію як у процесі дихання, і при бродінні. При зброджуванні вуглеводів Е. coliнакопичують кислоти - молочну, оцтову, янтарну ( позитивна реакціяз метиловим червоним) та гази - С0 2 і Н 2 (бродильна проба). Ешеріхії добре ростуть на простих живильних середовищах. Оптимальна температура зростання становить 37°С, оптимальне значення pH середовища – 7,0-7,4.

Таблиця 12.2

Ознаки пологів, що належать до БГКП

Рід Enterobacter.Представники роду виявляються в прісної води, ґрунті, стічних водах, на рослинах, овочах; їх виділяють із кишечника людини та тварин. Види роду в Останніми рокамивиділяють при гострих шлунково-кишкових захворюваннях, диспепсії, інфекціях жовчних та сечових шляхів, гнійних ураженнях мозкових оболонок, сепсисі у людей та тварин. Типовий вигляд - Е. cloacae.

Клітини Enterobacter -прямі палички розміром (2-3) х (0,5-0,6) мкм, перитрихи, грамнегативні, не утворюють спор та капсул. Оптимальна температура зростання 30-37 °С. Біохімічні ознаки видів цього роду: утворення ацетоїну при зброджуванні вуглеводів (позитивна реакція Фогес-Проскауера), розщеплення цитрату натрію серед Сіммонса.

Рід Citrobacter (citrus- (лимон) та bacter).Представники цього роду присутні у фекаліях людини та тварин, ґрунті, стічних водах, харчових продуктах. При певних умоввони можуть викликати захворювання, що протікають на кшталт гастроентеритів, диспепсій. При розвитку гнійно-запальних процесів найбільш значущим є вид C.freundii,Котрий є типовим виглядомцього роду. Клітини цитробакторів – прямі палички розміром (1-6) х (0,5-0,8) мкм, одиночні або в парах. Перитрихи. Суперечка та цист не утворюють, капсул не утворюють. З. freundiiпродукує сірководень. На кров'яному агарі навколо колоній утворюються чіткі зони гемолізу.

Рід Klebsiellaназвано на честь бактеріолога Е. Клебса. Бактерії цього виду виділяють із води, грунту, харчових продуктів. Вони є у біоценозах носоглотки, кишечника. Викликають захворювання клебсієльоз у дітей віком до 1 року. Захворювання протікає як діареї, менінгіту, бронхопневмонії, гнійносептичних запалень. Представники роду: К. pneumonia,

К. mobilisта сапрофітні види: К. planticola, К. terrigena.Це прямі палички розміром (0,6-6,0) х (0,3-1,0) мкм, поодинокі або в парах. Відрізняються від інших ентеробактерій характерними ознаками: мають класичну полісахаридну капсулу і позбавлені джгутиків. Типовий вигляд - Klebsiella pneumonia.

Рід Serratia.Назва роду пов'язана з ім'ям італійського фізикаСерафіно Серраті. Вони зустрічаються в ґрунті, воді, на поверхні рослин, а також у травному тракті людини, комах та гризунів як комэнсали. У осіб з ослабленою імунною системою серрації можуть викликати гнійні запалення різної локалізації. Типовий вигляд - Serratia marcescens. Serratia marcescens -це прямі дрібні палички розміром (05-08) х (09-20 мкм). Перитрихи за певних умов здатні утворювати капсулу. Більшість колоній Serratiaпофарбовані у різні відтінки червоного кольору за рахунок утворення пігменту продігіозину.

При характеристиці БГКП враховуються такі диференційно-діагностичні ознаки:

• 1) інкубація посівів при єдиному температурному режимі- 37 ° С;
• 2) здатність ферментувати лактозу - характер зростання серед Ендо (так званий лактозний тест). Враховуються колонії темно-червоні, з металевим блискомабо без нього;
• 3) оксидазний тест: колонії на середовищі Ендо досліджуються на наявність оксидази. Для подальшої ідентифікації залишають оксидазонегативні колонії. Колонії з позитивним оксидазним тестом, що відносяться до грамнегативних бактерій пологів Pseudomonas, Aeromonas, Vibrio,не враховуються;
• 4) препарати з характерних колоній забарвлюють за Грамом - враховуються грамнегативні палички;
• 5) бродильна проба на середовищі Гісса з глюкозою для виявлення здатності бактерій ферментувати глюкозу з утворенням кислоти та газу.

Крім БГКП збудниками кишкових захворювань, спричинених вживанням контамінованих харчових продуктів, можуть бути також бактерії пологів Morganellaі Providenciaіз сімейства Enteribacteriaceae.

Санітарно-епідеміологічні правила та нормативи СанПіН 2.1.4.1074-01 «Питна вода. Гігієнічні вимогидо якості води централізованих системпитного водопостачання. Контроль якості." застосовуються щодо води, що подається системами водопостачання та призначеної для споживання населенням у питних та побутових цілях, для використання у процесах переробки продовольчої сировини та виробництва харчових продуктів, їх зберігання та торгівлі, а також для виробництва продукції, яка потребує застосування води питної якості.
Коліформні бактерії

Для того, щоб пити чисту воду, її потрібно, перш за все, оцінити на приклад змісту різного родувключень. Навіть вода з крана може бути заражена бактеріями. І причина тому, поганий стансистеми водопостачання. Дуже часто у воді, особливо неочищеної сьогодні, можна зустріти різного роду бактерії. А щоб вода стала питною, коліморфні бактерії у воді слід знищувати.
Виявити бактерії у воді не так просто. Їх не побачити чи не відчути на смак. Будь-яка присутність коліформних бактерій у воді чи якихось інших, може викликати масові епідемії. Тому і поставлено заборону на їхню присутність. Це може привести до летального результатубагатьох людей. Черевний тиф, дизентерія, саме ті хвороби, які виявляють себе при вживанні зараженої кишкової паличкою води. Щоб уникнути масового зараження потрібно постійно стежити за складом води.

Коліформні організми вже давно вважаються зручними мікробними індикаторами якості питної води, головним чином тому, що легко піддаються виявленню та кількісному визначенню.

Загальні коліформні бактерії

Термотолерантні фекальні коліформи

Термотолерантні фекальні коліформи згідно СанПіН повинні бути відсутніми в 100 мл досліджуваної питної води.

Термотолерантні фекальні коліформи є мікроорганізмами, здатними ферментувати лактозу при 44 °С або 44,5 °С.
Вторинне зростання фекальних коліформ у розподільчій мережі малоймовірне, за винятком тих випадків, коли є достатня кількість поживних речовин(БПК більше 14 мг/л), температура води вища за 13 °С, а вільний залишковий хлор відсутній. Цей тест відсікає сапрофітну мікрофлору.

Коліформи можуть свідчити про влучення у воду патогенних мікроорганізмів. Кишкові патогенні хвороби поширені у всьому світі. Серед збудників, що зустрічаються у забрудненій питній воді, виявляють штами сальмонел, шигел, ентеропатогенної кишкової палички, холерного вібріона, ієрсинії, ентероколітики, кампілобактеріозу. Ці організми викликають захворювання, що варіюють від легкої формигастриту до важких, котрий іноді летальних форм дизентерії, холери, черевного тифу.

Інші організми, які природно присутні у навколишньому середовищі і не вважаються патогенними агентами, можуть іноді викликати опортуністичні захворювання (тобто захворювання, викликані умовно-патогенними мікроорганізмами – клебсієлами, псевдомонадами та ін.). Такі інфекції найчастіше виникають у осіб із порушеннями імунної системи(Місцевого або загального імунітету). При цьому питна вода, що використовується ними, може викликати різні інфекції, у тому числі ураження шкіри, слизових очей, вуха, носоглотки.
Не наражайте себе і своїх близьких на небезпеку, вживайте тільки перевірену воду!

БГКП.До бактерій групи кишкових паличок (коліформних) відносять пологи. Escherichia(типовий представник E. coli), Citrobacter(типовий представник C. colicitrovorum), Enterobacter(типовий представник E. aerogenes), які об'єднані в одну родину Enterobacteriaceaeзавдяки спільності властивостей.

Загальна хар-ка БДКП: - палички грам-негативні, короткі; - не спороутворюючі; - на середовищі Енду дають червоні колонії з металевим блиском - E.coli, Червоні – ентеробактерії, рожеві – цитробактерії, б/цв – лактозо – негативні. Біохімічні властивості.Більшість бактерій групи кишкових паличок (БГКП) не розріджують желатину, згортають молоко, розщеплюють пептони з утворенням амінів, аміаку, сірководню, мають високу ферментативну активність щодо лактози, глюкози та інших цукрів, а також спиртів. Не мають оксидазної активності. Стійкість.Бактерії групи кишкових паличок знешкоджуються звичайними методами пастеризації (65-75 ° С). При 60 ° С кишкова паличка гине через 15 хвилин. 1% розчин фенолу спричиняє загибель мікроба через 5-15 хвилин. Санітарно-показове значення.Бактерії роду Escherichia- Постій. жителі кишечника чол і тварин, і виявлення їх у воді та ПП свідчень про свіже фекальне забруднення. Бактерії пологів Citrobacterі Enterobacte r можуть бути всюди: у грунті, на рослинах, рідше в кишечнику. Вважають, що вони є результатом змінений ішерихій після перебування їх у зовнішньому середовищіі тому є показниками давнішого фекального забруднення. Значення БДКП:

У сирому молоці вказує - на епідеміологічну небезпеку

За кілька годин при 8-10 про З - порушення умов зберігання та реалізації, транспортиров.

Появл. БГКП після пастеризації оцінюють як друге забруднення

Наявність БДКП у готової продукціївказує на - погану мийку та дезінфекцію обладнання.

РідSalmonella . Сальмонельози належать до найпоширеніших токсикоінфекцій. Виявлення сальмонел завжди свідчить про фекальне забруднення. Сальмонели стійкі до високих концентрацій кухонної солі(особливо в середовищах, що містять білок) та висушування. Зберігають свою життєздатність у кімнатному пилу, у різних ґрунтах (97 міс.), у воді відкритих водойм (до 45 днів). Перебуваючи в ПП, особливо м'ясних, сальмонели дуже стійкі до теплової обробки. Солення та копчення м'яса мають слабкий вплив на сальмонел. При розмноженні сальмонел у молоці його зовнішній вигляді смак не змінюються, пастеризація молока протягом 30 хв при 85 º С у виробничих умовах сприяє повному знищенню цих бактерій. Людина заражається сальмонелами в результаті вживання м'яса і м'ясопродуктів. Молоко і молочні продукти набагато рідше явл причиною харчових отруєнь. Інфікування молока головним чином відбувається через забруднений посуд, доїльні апарати, руки доїльниць та ін. овочевими приправами та спеціями.

Ідентифікація БДКП:

● Посів на середу збагачення - Кесслер, одночасна ідентифікація по газообразов.: є газоутворення - можливо БКГП, немає газоутворення - немає БГКП

● Ідентифікація БГКП на середовищі Ендо: З газ(+) пробірок відбирають по 1 мл і сіють на тв. середу Ендо, ідентифікують колонії БГКП за кольором, проводять диференціацію за родами залежно від кольору колоній: Якщо є червоні, рожеві та блідо-рожеві культури - отже, присутні БГКП, якщо немає колоній – немає БГКП. Якщо є колонії, але безбарвні – підозра на патогени. Далі за кольором ідентифікують пологи БГКП: 1) червоні – з металлич. відтінок. - Ешерихія 2) рожеві - ентеробактер 3) блідо-рожеві - зі слизом - клебсієла 4) блідо-рожеві - цитробактер, церації 5) безбарвні (лактозо (-)) - протей 6) прозорі дрібні - патогенні

● Ідентифікація на середовищі Козера: вирощування на середовищі з глюкозою/лимонною кислотою Т=43°С,24год. М/о цитрат(+) змінюють колір барвника із зеленого на волошковий. М/о цитрат(-) не змінює колір.

Визначають за кількістю позитивних проб у 3 пробірках.

Сальмонели- Патогенні, аналізують в 25 г продукту, їх там не повинно бути. Служать індикатором патогенів.

Виявлення сальмонел проводиться у 4 етапи

1) первинний (прямий) посів - Посів на середу Енду і Плоскірава на добу і Т = 37 0 С. На пор. Енда – прозорі колонії,

2) збагачення (посів на рідкі селективні середовища, термостатування)

3) посів з середовища збагачення осущ після збагачення на щільні діагностичні середовища, термостатування - на порівн. Плоскірава-прозорі, але дрібніші ніж на середовищі Ендо

4) підтвердження шляхом встановлення ферментативних та серологічних властивостей сальмонел

©2015-2019 сайт
Усі права належати їх авторам. Цей сайт не претендує на авторства, а надає безкоштовне використання.
Дата створення сторінки: 2017-04-20

Організми – індикатори фекального забруднення

Використання типових кишкових організмів як індикатори фекального забруднення (а не самих патогенних агентів) є загальновизнаним принципом моніторингу та оцінки мікробіологічної безпеки водопостачання. В ідеалі виявлення таких індикаторних бактерій має означати можливу присутність усіх патогенних агентів, що супроводжують таке забруднення. Індикаторні мікроорганізми повинні легко виділятися із води, ідентифікуватися та кількісно визначатися. При цьому вони повинні довше виживати і в водному середовищі, ніж патогенні агенти, і повинні бути більш стійкими до знезаражувальної дії хлору, ніж патогенні. Практично якийсь один організм не може відповідати всім цим критеріям, хоча багато з них мають місце у разі коліформних організмів, особливо Е. соli – важливого індикатора забруднення води фекаліями людини та тварин. Інші організми, що задовольняють деяким із цих вимог, хоча й не такою мірою, як коліформні організми, також можуть у деяких випадках використовуватися як додаткові показники фекального забруднення.

До коліфрмних організмів, що використовуються як індикатори фекального забруднення, відносять загальні коліформи, в т.ч. та Е. соli, фекальні стрептококи, сульфітредукуючі спороносні клостридії, особливо, клостридія перфрінгенс. Є й інші анаеробні бактерії (наприклад, біфідобактерії), великих кількостяхщо зустрічаються у фекаліях. При цьому рутинні методи їх виявлення надто складні та тривалі. З цієї причини фахівці в галузі водної бактеріології зупинилися на простих, доступних і достовірних методахкількісного виявлення індикаторних коліформних мікроорганізмів, використовуючи у роботі титраційний метод (серійних розведень) чи метод мембранних фільтрів.

Коліформні організми вже давно вважаються зручними мікробними індикаторами якості питної води, головним чином тому, що легко піддаються виявленню та кількісному визначенню. Це грамнегативні палички, вони мають здатність ферментувати лактозу при 35-37 °С (загальні коліформи) і при 44-44,5 °С (термотолерантні коліформи) до кислоти і газу, оксидазонегативні, не утворюють суперечку і включають види Е. соli, цитробактор , ентеробактер, клебсієл.

Загальні коліформні бактерії згідно СанПіН повинні бути відсутніми в 100 мл питної води.

Бактерії групи кишкової палички (БГКП) - це умовно виділяється за морфологічними і культуральними ознаками група бактерій сімейства ентеробактерій, використовувана санітарної мікробіологією як маркер фекальної контамінації, належать до групи про санітарно-показових мікроорганізмів.

До бактерій групи кишкових паличок відносять представників пологів Escherichia (у тому числі і Е. coli), Citrobacter (типовий представник C. coli citrovorum), Enterobacter (типовий представник E. aerogenes), які об'єднані в одне сімейство Enterobacteriaceae завдяки спільності морфологічних та культуральних властивостей . Вони характеризуються різними ферментативними властивостями та антигенною структурою.

4. Наявність яких бактерій свідчить про свіже фекальне забруднення води?

До таких бактерій відносять термотолерантні коліформні бактерії, фекальні кишкові палички, що ферментують лактозу до кислоти і газу при температурі 44°С протягом 24 годин і не ростуть на нітратному середовищі.

Про свіже фекальне забруднення свідчить також виявлення ентерококу.

Відомий спосіб визначення свіжого фекального забруднення, що полягає у виділенні з досліджуваної води ентерококів і при індексі цих мікроорганізмів понад 500 передбачається надходження свіжого фекального забруднення.

5. Які показники визначають при санітарно-мікробіологічному дослідженні води?

1. Визначення кількості сапрофітних мікроорганізмів.

2 . Визначення числа лактозопозитивних кишкових паличок.

3 . Визначення числа Escherichia coli.

4. Визначення числа ентерококів.

5 . Визначення числа стафілококів.

6 . Визначення числа боїв фагів кишкових паличок.

7 . Визначення бактерій пологів сальмонела та шигела.

8 . Визначення наявності кишкових вірусів.

9 . Визначення холерного вібріона.

6. Що таке "мікробне число" та як його визначають?

Мікробне число – це кількісний показникбактеріальної зараженості довкілляодин з лабораторних санітарно-гігієнічних показників, що вказує на «загальну кількість мікробів» в 1 мл води, 1 г твердого продукту або ґрунту, 1 м 3 повітря, що виросли на МПА при 37 ° С за 48 год.

Для визначення мікробного числа роблять посіви з дотриманням правил асептики чашки Петрі з МПА методом заливання з таким розрахунком, щоб на чашках виростало від 30 до 300 колоній.

7. Який метод використовують для виявлення БГКПв воді?

Для визначення кількості бактерій групи кишкової палички існує два методи: бродильний та мембранний фільтр.

Сутність методу мембранних фільтрів полягає у концентруванні бактерій з певного об'єму досліджуваної води на мембранному фільтрі та вирощуванні їх при температурі 37 ± 0,5 ° С в середовищі Ендо. При цій температурі створюються оптимальні умовидля вирощування бактерій

8. Для яких цілей використовують методи Коха та Кротова?

Методи Коха та Кротова використовують для санітарно-мікробіологічного дослідження повітря.

9. Назвіть санітарно-показові мікроорганізми, за наявності яких у повітрі можна оцінити його чистоту?

Санітарно-показовими мікроорганізмами для повітря є золотисті стафілококи та гемолітичні стрептококи (Staphylococcus aureus, група Streptococcus viridans та Streptococcus haemolyticus).

10. У чому полягає аспіраційний метод і з метою його використовують?

Аспіраційний метод заснований на примусовому осіданні мікроорганізмів на поверхню щільного живильного середовища або в рідину, що вловлює. Для цієї мети використовуються апарат Кротова, бактеріоуловлювач Речменського, прилад ПОВ-1 та ін.

Для визначення загальної кількостібактерій забирають дві проби по 100 л кожна. Посіви інкубують у термостаті 24 год, а потім залишають на 48 год при кімнатній температурі. Підраховують кількість колоній на чашках, обчислюють середнє арифметичне і роблять перерахунок кількості мікроорганізмів в 1 м 3 повітря.

Дослідження повітря включає визначення загальної кількості сапрофітних бактерій, стафілококів, стрептококів, які є показниками біологічної контамінації повітря мікрофлорою носоглотки людини.

11. На яких середовищах культивують БДКП?

На середовищі Ендо, на простих живильних середовищах: м'ясопептонному бульйоні (МПБ), м'ясопептонному агарі (МПА).

12. Які об'єкти та предмети підлягають дослідженню у приміщеннях аптек при санітарно-мікробіологічному контролі?

Об'єкти бактеріологічних досліджень у приміщеннях аптек при санітарно-мікробіологічному контролі:

1 . Вода дистильована.

2 . Ін'єкційні розчини до стерилізації.

3 . Ін'єкційні розчини після стерилізації.

4 . Очні краплі після стерилізації.

5 . Очні краплі, виготовлені в асептичних умовах на стерильних основах.

6 . Сухі лікарські речовини, які використовуються виготовлення ін'єкційних розчинів.

7. Аптечний посуд, пробки, прокладки та інші допоміжні матеріали.

8. Інвентар, обладнання, руки та санітарний одяг персоналу.

9 . Повітряне середовище.